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什么是氨基酸的Sanger反应?

发布时间:2022-05-13 01:57:20      浏览:198

一、什么是Sanger反应

在弱碱性溶液中,氨基酸的α-氨基很容易与2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)起反应,生成稳定的黄色物质——2,4-二硝基苯氨基酸(DNP-氨基酸)。此反应最初由Frederick Sanger发现,因此也叫Sanger反应,而DNFB也称为Sanger试剂。

二、Sanger反应特点

多肽或蛋白质在N-端游离的α-氨基也能与DNFB反应,但生成的是DNP-多肽或DNP-蛋白质。由于DNP与氨基结合牢固,不易被解,因此当DNP-多肽被酸完全水解以后,原来的N-端氨基酸成为黄色的DNP-氨基酸。因为DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯或乙醚等有机溶剂,所以可以用这两种试剂对其进行抽提,随后进行色谱分析,并以标准的DNP-氨基酸作为对照,就可以鉴定出此氨基酸的种类。Sanger当初就是使用上述方法,测出胰岛素两条链在N-端的氨基酸。现在仍然有人使用他发明的方法,来鉴定多肽或蛋白质的N-端氨基酸。

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